看白癜风选老牌医院 http://m-mip.39.net/news/mipso_5778380.html边缘叶脑炎(limbicencephalitis,LE)是颞叶癫痫的一大病因，除产生自身抗体外，近期研究表明自身免疫性脑炎患者的海马中有较多CD8+T细胞浸润，但这些T细胞是否参与自身免疫性脑炎相关的致痫过程尚不清楚。近期，德国波恩大学医疗中心的Albert教授课题组利用T细胞受体相关转基因小鼠证明CD8阳性T细胞参与自身免疫性脑炎致痫过程，相关研究成果发表于AnnalsofNeurology。●边缘叶脑炎模型小鼠出现癫痫发作和记忆损害本研究中用到的动物模型是向T细胞受体相关转基因小鼠(OT-I小鼠)注射编码鸡卵清蛋白的rAAV所形成的边缘叶脑炎模型（称作OVA-CD8+LE小鼠）。此模型具有两个特点：一是含有编码特殊的T细胞受体的序列，后者可识别有MHCI递呈的鸡卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)，二是敲除了Rag1基因，因此不能表达内源性受体的成熟T细胞或B细胞。作者采用立体定向注射技术，将编码鸡卵清蛋白的腺相关病*注射至OT-I小鼠的海马CA1区，OVA产生的外源性抗原（SIINFEKL肽段）经MHCI细胞递呈后，刺激OT-I小鼠产生OVA特异性的CD+T细胞，成功造出OVA-CD8+LE小鼠模型后进行视频行为监测和脑电记录，结果提示OVA-CD8+LE小鼠出现明显的癫痫发作。为检测小鼠的认知损害情况，分别急性期和慢性期（造模后第7天和第40天）进行了新物体识别、旷场试验、转杆试验等一系列的行为学测试，结果提示OVA-CD8+LE小鼠出现记忆损害。●边缘叶脑炎模型小鼠具有脑水肿，血脑屏障破坏和神经元凋亡表现AAV-hSyn-OVA-IRES-Venus注射后7天行头颅核磁共振(MRI)检测，可见炎症介导的脑水肿和血脑屏障功能破坏，病理检测提示明显的单核细胞浸润，CA1区节段性神经元死亡，和代表血脑屏障功能损害的清蛋白渗出。第40天再次行MRI检测，可见脑萎缩和残留的血脑屏障功能破坏。●神经元凋亡在急性期和慢性期的不同表现为进一步了解OT-I小鼠炎症的特异性和动力学，作者将SIINFEKL肽段分别与NeuN,GFAP和IBA1共标进行免疫荧光染色，结果提示rAAV注射后第2天和第5天可见神经元中表达SIINFEKL，而在注射后28天，由于神经元丢失导致信号明显减弱，代之以星形胶质细胞和小胶质细胞激活。将OVA抗体分别与NeuN(神经元标志物),GAD65(中间神经元标志物),GFAP(星形胶质细胞标志物),CC1少突胶质细胞标志物)和IBA1(小胶质细胞标志物)共标做免疫组化也得到相似结果。●CD8阳性T细胞选择性攻击表达外源性抗原的神经元既然海马神经元特异性表达OVA，作者进一步设计实验以验证产生的CD8+T细胞是否会对神经元的发动攻击，结果提示rAAV注射后5天即大量CD8+T细胞浸润至海马CA1区，并且与SIINFEKL在神经元表面共定位。边缘叶脑叶的基本特点之一是存在自身抗体。作者进行了一系列自身抗体筛查实验，包括免疫印迹法、免疫荧光染色等方法，均未检测到抗NMDAR,抗GAD65,抗AMPAR和抗Ovalbumin的自身抗体，这进一步说明了神经元的凋亡是受到CD8+T细胞而非自身抗体的攻击。●小结本研究表明，在自身免疫性脑炎动物模型中，浸润的CD8+T细胞可引起神经元异常放电和神经元死亡等退行改变，从而临床表现为癫痫发作和认知损害，此项研究结果为未来以浸润CD8+T细胞为靶点的抗癫痫和神经保护治疗提供了依据。
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